方法一，BIOS设置法（快刀斩乱麻法）
进入BIOS设置，选择“Integrated Peripherals”选项，展开后将“USB 1.1 Controller”和“USB 2.0 Contr01ler”选项的属性设置为“Disableed”，即可禁用USB接口。最后别忘记给BIOS设置上一个密码，这样他人就无法通过修改注册表解“锁”上述设备了。
注意：这个方法是完全禁止了USB接口，也就是说各种USB接口的设备均不能用了，当然也包括了U盘和移动h盘。由于此法过于霸道，请慎用。
方法二，禁止闪盘或移动硬盘的启动（适用于Windows XP/2000/2003）
打开注册表编辑器，依次展开如下分支[HKEY_LOCAL_MACHINE\SYSTEM\CurrentCntrolSet\Services\USBSTOR]，在右侧的窗格中找到名为“Start”的DWORD值，双击，在弹出的编辑对话框中将其数值数据修改为十六位进制数值“4”。点“确定”按钮并关闭注册表编辑器，重新启动计算机，使设置生效。重启后，当有人将USB存储设备连接到计算机时，虽然USB设备上的指示灯在正常闪烁，但在资源管理器当中就是无法找到其盘符，因此也就无法使用USB设备了。
方法三，隐藏盘符和禁止查看（适用于Windows系统）
打开注册表编辑器，依次展开如下分支[HKEY_CURRENT_USER\software\Microsoft\Windows\CurrentVersion\Ploicies\Explorer]，新建二进制值“NoDrives”，其缺省值均是00 00 00 00，表示不隐藏任何驱动器。键值由四个字节组成，每个字节的每一位（bit）对应从A:到Z:的一个盘，当相应位为1时，“我的电脑”中相应的驱动器就被隐藏了。第一个字节代表从A到H的8个盘，即01为A，02为B，04为C……依次类推，第二个字节代表I到P，第三个字节代表Q到X，第四个字节代表Y和Z。比如要关闭C盘，将键值改为04 00 00 00；要关闭D盘，则改为08 00 00 00，若要关闭C盘和D盘，则改为0C 00 00 00(C是十六进制，转成十进制就是12)。
理解了原理后，下面以我的电脑为例说明如何操作：我的电脑有一个软驱、一个硬盘(5个分区)、一个光驱，盘符分布是这样的：A:（3.5软盘）、C:、D:、E:、F:、G:、H:（光盘），所以我的“NoDrives”值为“02 ff ff ff”，隐藏了B、I到Z盘。
重启计算机后，再插入U盘，在我的电脑里也是看不出来的，但在地址栏里输入I:（我的电脑电后一个盘符是H）还是可以访问移动盘的。到这里大家都看得出“NoDrives”只是障眼法，所以我们还要做多一步，就是再新建一个二进制“NoViewOnDrive”，值改为“02 ff ff ff”，也就是说其值与“NoDrives”相同。 这样一来，既看不到U盘符也访问不到U盘了。
方法四，禁止安装USB驱动程序
在Windows资源管理器中，进入到“系统盘:\WINDOWS\inf”目录，找到名为“Usbstor.pnf”的文件，右键点击该文件，在弹出菜单中选择“属性”，然后切换到“安全”标签页，在“组或用户名称”框中选中要禁止的用户组，接着在用户组的权限框中，选中“完全控制”后面的“拒绝”复选框，最后点击“确定”按钮。
再使用以上方法，找到“usbstor.inf”文件并在安全标签页中设置为拒绝该组的用户访问，其操作过程同上。完成了以上设置后，该组中的用户就无法安装USB设备驱动程序了，这样就达到禁用的目的。
注意：要想使用访问控制列表(ACL)，要采用NTFS文件系统。
以下是微软官方资料
禁用 USB 存储设备
要禁用 USB 存储设备，请根据您的具体情况使用下面的一个或多个步骤：
如果计算机上尚未安装 USB 存储设备
如果计算机上尚未安装 USB 存储设备，请向用户或组分配对下列文件的“拒绝”权限：
%SystemRoot%\Inf\Usbstor.pnf
%SystemRoot%\Inf\Usbstor.inf
这样，用户将无法在计算机上安装 USB 存储设备。 要向用户或组分配对 Usbstor.pnf 和 Usbstor.inf 文件的“拒绝”权限，请按照下列步骤操作： 1. 启动 Windows 资源管理器，然后找到 %SystemRoot%\Inf 文件夹。
2. 右键单击“Usbstor.pnf”文件，然后单击“属性”。
3. 单击“安全”选项卡。
4. 在“组或用户名称”列表中，单击要为其设置“拒绝”权限的用户或组。
5. 在“UserName or GroupName 的权限”列表中，单击以选中“完全控制”旁边的“拒绝”复选框，然后单击“确定”。
注意：此外，还需将系统帐户添加到“拒绝”列表中。
6. 右键单击“Usbstor.inf”文件，然后单击“属性”。
7. 单击“安全”选项卡。
8. 在“组或用户名称”列表中，单击要为其设置“拒绝”权限的用户或组。
9. 在“UserName or GroupName 的权限”列表中，单击以选中“完全控制”旁边的“拒绝”复选框，然后单击“确定”。
如果计算机上已经安装了 USB 存储设备
警告：注册表编辑器或其他方法使用不当可能导致严重问题。这些问题可能需要重新安装操作系统。Microsoft 不能保证您可以解决这些问题。修改注册表需要您自担风险。 如果计算机上已经安装了 USB 存储设备，请将以下注册表项中的“Start”值设置为 4：
HKEY_LOCAL_MACHINE\SYSTEM\CurrentControlSet\Services\UsbStor
这样，当用户将 USB 存储设备连接到计算机时，该设备将无法运行。要设置“Start”的值，请按照下列步骤操作： 1. 单击“开始”，然后单击“运行”。
2. 在“打开”框中，键入 regedit，然后单击“确定”。
3. 找到并单击下面的注册表项： HKEY_LOCAL_MACHINE\SYSTEM\CurrentControlSet\Services\UsbStor
4. 在右窗格中，双击“Start”。
5. 在“数值数据”框中，键入 4，单击“十六进制”（如果尚未选中），然后单击“确定”。
6. 退出注册表编辑器。
